使用说明：
1. Mito-Tracker Deep Red FM 储存液的配制：
使用DMSO配制Mito-Tracker Deep Red FM 至终浓度为1mM。例如91.9 μL DMSO 溶解 50 μg Mito-Tracker Deep Red FM 。

注：配制后的储存液建议分装后于-20℃或更低温度避光保存。

2. Mito-Tracker Deep Red FM 工作液的配制：
a. 取1mM Mito-Tracker Deep Red FM 储存液按照1:5000-1:50000的比例加入到细胞培养液或PBS中(需预热），使最终浓度为20-200nM。例如取1μl Mito-Tracker Deep Red FM 加入到50ml或5ml细胞培养液或PBS中。混匀后即为Mito-Tracker Deep Red FM 工作液。

注：工作液中Mito-Tracker Deep Red FM 的浓度可以根据实际情况进行适当调整。为降低背景，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的Mito-Tracker Deep Red FM 。且现用现配。
3. 线粒体的荧光标记：
a. 去除细胞培养液，加入步骤2配制好的Mito-Tracker Deep Red FM 染色工作液，与细胞37℃共孵育15-45分钟。
b. 去除Mito-Tracker Deep Red FM 染色工作液，加入37℃预温育的新鲜细胞培养液。
c. 随后通常用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。此时可观察到线粒体呈明亮的强荧光染色。如果染色效果欠佳，可以提高Mito-Tracker Deep Red FM 染色工作液中Mito-Tracker Deep Red FM 的浓度或在推荐的时间范围内适当延长染色时间。

4.细胞染色（悬浮细胞）

a.离心收集细胞，加入PBS 洗涤两次，每次5分钟。细胞密度在 1×106/mL。

b. 加入1 mL Mito-Tracker Deep Red FM 工作液，室温孵育 15-45 分钟。
c. 400g，离心 3-4 分钟，去上清。
d. 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
e. 用1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

C₃₄H₃₆Cl₂N₂

DMSO