产品简介：

常规DNA含量的检测方法是在260nm（A260）处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大，并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰，无法区分DNA和RNA，而且这种方法不灵敏（5μg/mLdsDNA溶液A260=0.1）。本试剂盒定量检测方法简单、方便，被多家生物制品厂所选择，成为生物制品残留DNA检测的标准。目前该方法已纳入2010年版《中国药典》

例如：Nanodrop系列微量分光光度计是目前最常见的紫外吸光法检测样品的浓度及纯度， 由于它会检测吸光度在260nm处所有物质的吸光值（如DNA/RNA以及降解核酸和游离核苷酸等其他杂质），因此读数并不是十分准确。而荧光计通过荧光染料与特定目标分子结合后，检测其荧光强度来测目标分子的浓度，因此其定量结果一般低于A260nm处的读数，但是更为准确。

重要的是准确的DNA定量对于后续应用至关重要。 Nanodrop系列全波长微量分光光度计无法精确测定 5ng/ul 以下的 DNA 浓度，然而，许多 DNA 样品又恰在这个范围之内，在检测双链 DNA 时，荧光计的检测极限可达 0.5pg/ul。此时，更灵敏的荧光计似乎是个更好的选择。 荧光计和相应的定量试剂盒，能快速灵敏、精确测定 DNA 的浓度。

本试剂将被用于成本昂贵的下游实验:qPCR 、PCR 克隆、转染和新一代测序等精密测定的实验，精准定量范围10pg /μL至10ng/μL。

检测原理：

绿色荧光染料与DNA双链结合后才会发出荧光，无DNA不发荧光；所发荧光与DNA浓度成正比。在2010年《中国药典》中提出，本试剂盒定量DNA的方法检出下限约10pg/uL，DNA含量在10pg/uL~10ng/uL 范围时线性较好(R2>0.99). 本试剂盒利用绿色DNA 染料能够特异性结合双链DNA，而不与蛋白质、RNA、盐离子结合的原理，通过激发光照射，Qubit 检测仪收集发射光，特异的分析样品中双链 DNA 的实际含量，能够排除样品中蛋白质、RNA、盐离子等物质的干扰，从而对双链DNA进行精准的定量。

优点：

1）该方法可以测定来源于任何表达宿主样品中的双链DNA。

2）可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。

3）远远超出传统紫外A260的检测方法和Hoechst33258的灵敏度。

4）特异性检测与Mg2+、氯化钠、醋酸钠、醋酸铵、乙醇、苯酚、氯仿、SDS、RNA、蛋白质、Triton-X100、 dNTPS、BSA等干扰物没有交叉反应。

5）在等摩尔浓度 ssDNA 和 RNA 存在的条件下测定 dsDNA，其影响很小。

所需器材：

一次性无尘手套、 Qubit assay tubes (500 tubes, Life Technologies, Cat. no. Q32856)或者 Axygen PCR-05-C tubes(VWR, part no. 10011-830)； 荧光仪（Qubit 2.0 ，Qubit 3.0 等荧光仪）

注意事项：

1. 检测温度：所有检测必须在室温操作(22–28˚C)；

2. 孵育时间：DNA 与工作液混合后，反应 3min，荧光信号在 3 个小时内都是稳定的。

3. 荧光校准：每次使用前，请按照批次使用校准，以确保实时检测数据的一致性。