Blasticidin S
(杀稻瘟菌素S)
杀稻瘟菌素 S是一种常用的抗生素,常用于筛选携带了BSR或BSD耐受基因的转染细胞,杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式,很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。

CAS NO.:3513-03-9
规格 | 价格 | 库存 |
---|---|---|
1ml(10mg/ml) | 565.00 | 现货 |
5X1ml(10mg/ml) | 2200.00 | 现货 |
10X1ml(10mg/ml) | 4000.00 | 现货 |
基本信息
杀稻瘟菌素 S是一种常用的抗生素,常用于筛选携带了BSR或BSD耐受基因的转染细胞,杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式,很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。 目前已经克隆和测序的杀稻瘟菌素耐受基因有3种,一种是分离自产生菌Streptoverticillum sp.的乙酰基转移酶基因bls,另外两种是脱氨酶基因,包括从Bacillus cereus 中分离的bsr和从Aspergillus terreus 中分离的BSD 基因。Bsr和 BSD 基因是最常用的筛选标志,用于哺乳动物和植物细胞的基因转移实验,也可用于E.Coli。 应用浓度: 1)Escherichia coli E. coli对Blasticidin S的敏感性稍差,但是转化子对Blasticidin S具有耐受性,可以用低盐的LB培养基(pH8.0)进行筛选,浓度范围为50-100 μg/ml Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。 2)哺乳动物细胞 哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1-50 μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。 对于细菌建议浓度:25-100 µg/ml 对于哺乳动物细胞建议浓度:1-30 µg/ml 操作步骤(哺乳动物稳转株筛选): Blasticidin S通常使用浓度为10 μg/ml。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞中,在含有Blasticidin S的正常生长培养基中孵育,用于筛选稳定转染细胞株。 (1)转染后48h,用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代(注:细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高,抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过25%); (2)每3-4天去除培养基,加入含抗生素的新鲜培养基; (3)7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率,集落形成可能需要增加一周或更久。 (4)转移5-10个耐受克隆到35mm细胞盘中,加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。 |
|
CAS | 3513-03-9 |
分子量 | 458.9 |
分子式 |
C17H26N8O5.HCL |
溶剂 |
培养基 |
纯度 | 95% |
存储温度 | -20℃ |
相关说明文档
储备液配置
浓度
体积
质量
|
1mg | 5mg | 10mg |
1 mM | 2.1791 mL | 10.8956 mL | 21.7912 mL |
5 mM | 0.4358 mL | 2.1791 mL | 4.3582 mL |
10 mM | 0.2179 mL | 1.0896 mL | 2.1791 mL |
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