Blasticidin S
(杀稻瘟菌素S)
杀稻瘟菌素 S是一种常用的抗生素，常用于筛选携带了BSR或BSD耐受基因的转染细胞，杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式，很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。
CAS NO.：3513-03-9
| 规格 | 价格 | 库存 |
|---|---|---|
| 1ml（10mg/ml） | 565.00 | 现货 |
| 5X1ml（10mg/ml） | 2200.00 | 现货 |
| 10X1ml（10mg/ml） | 4000.00 | 现货 |
基本信息
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杀稻瘟菌素 S是一种常用的抗生素，常用于筛选携带了BSR或BSD耐受基因的转染细胞，杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式，很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。 目前已经克隆和测序的杀稻瘟菌素耐受基因有3种，一种是分离自产生菌Streptoverticillum sp.的乙酰基转移酶基因bls，另外两种是脱氨酶基因，包括从Bacillus cereus 中分离的bsr和从Aspergillus terreus 中分离的BSD 基因。Bsr和 BSD 基因是最常用的筛选标志，用于哺乳动物和植物细胞的基因转移实验，也可用于E.Coli。 应用浓度： 1）Escherichia coli E. coli对Blasticidin S的敏感性稍差，但是转化子对Blasticidin S具有耐受性，可以用低盐的LB培养基（pH8.0）进行筛选，浓度范围为50-100 μg/ml Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。 2）哺乳动物细胞 哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1-50 μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。 对于细菌建议浓度：25-100 µg/ml 对于哺乳动物细胞建议浓度：1-30 µg/ml 操作步骤（哺乳动物稳转株筛选）： Blasticidin S通常使用浓度为10 μg/ml。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞中，在含有Blasticidin S的正常生长培养基中孵育，用于筛选稳定转染细胞株。 （1）转染后48h，用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代（注：细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高，抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过25%）； （2）每3-4天去除培养基，加入含抗生素的新鲜培养基； （3）7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率，集落形成可能需要增加一周或更久。 （4）转移5-10个耐受克隆到35mm细胞盘中，加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。 |
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| CAS | 3513-03-9 |
| 分子量 | 458.9 |
| 分子式 |
C17H26N8O5.HCL |
| 溶剂 |
培养基 |
| 纯度 | 95% |
| 存储温度 | -20℃ |
相关说明文档
储备液配置
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浓度
体积
质量
|
1mg | 5mg | 10mg |
| 1 mM | 2.1791 mL | 10.8956 mL | 21.7912 mL |
| 5 mM | 0.4358 mL | 2.1791 mL | 4.3582 mL |
| 10 mM | 0.2179 mL | 1.0896 mL | 2.1791 mL |
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